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                          收到細胞改如何處理呢?

                        1. 發布日期:2022-08-10      瀏覽次數:147
                          • 收到細胞改如何處理呢?很多人收到細胞的第一步處理方法就錯了!一個不小心后面的實驗都會受到影響,那么正確的方法應該怎么做呢,今天恒遠小編給大家總結收到細胞正確的處理方法。


                            1. 首先,觀察細胞培養瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。

                            2. 用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量叢瓶壁脫落;先不要打開培養瓶蓋,將細胞置于細胞培養箱內趨置培養2-4小時,以便穩定細胞狀態。

                            3. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

                            4. 靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態;建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。

                            5. 貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養瓶內培養基,預留5m左右繼續培養,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。

                            6. 懸浮細胞:將細胞培養瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離 心5min,離心后上清培養基可收集備用,管底細胞沉淀加入5m培養基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養瓶內培養,補加培養基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續培養,直至細胞密,度達80%左右時再進行傳代操作。


                            溫馨提醒:

                            可將培養瓶內多余的培養基轉移至50ml無菌離心管中備用;細胞傳代時,可以將該培養基按照一定比例和客自備的培養基混合使用,讓細胞逐漸適應培養條件。確認細胞狀態良好后,應及時將部分細胞凍存,再進行后續的實驗,避免后期實驗失誤可能發生細胞污染或死亡而導致的細胞丟失,影響后續實驗。


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