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                          人抗類固醇生成細胞抗體(SCA)ELISA試劑盒產品說明書

                        1. 發布日期:2022-08-25      瀏覽次數:92
                          • 使用目的:

                            本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中抗類固醇生成細胞抗體(SCA)表達

                            實驗原理

                            本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本抗類固醇生成細胞抗體(SCA)表達。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗可與樣品中抗類固醇生成細胞抗體(SCA)相結合經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后再與HRP標記的抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過徹底洗滌后底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中抗類固醇生成細胞抗體(SCA)的存在與否。

                            試劑盒組成

                            1

                            30倍濃縮洗滌液

                            20ml×1

                            7

                            終止液

                            6ml×1

                            2

                            酶標試劑

                            6ml×1

                            8

                            陽性對照

                            0.5ml×1

                            3

                            標包被

                            12孔×8

                            9

                            陰性對照

                            0.5ml×1

                            4

                            樣品稀釋液

                            6ml×1

                            10

                            說明書

                            1

                            5

                            顯色劑A

                            6ml×1

                            11

                            封板膜

                            2張  

                            6

                            顯色劑B

                            6ml×1/

                            12

                            密封袋

                            1

                            標本要求 

                            1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但避免反復凍融

                            2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

                            操作步驟

                            1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)

                            2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,

                            3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘   

                            4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

                            5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

                            6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外

                            7. 溫育:操作同3

                            8. 洗滌:操作同5

                            9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

                            10. 終止:每孔加終止50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)

                            11. 測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。


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