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                          人白介素10試劑盒

                          人白介素10試劑盒

                          簡要描述:
                          “人白介素10試劑盒 "適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本,靈敏度*。本司提供96人份/48人份兩種包裝,詳情請銷售人員!

                          更新時間:2022-08-08

                          訪問量:878

                          廠商性質:生產廠家

                          生產地址:美國

                          人白細胞介素-10(IL-10)酶聯免疫分析
                          試劑盒使用說明書
                          本試劑盒僅供研究使用。
                          檢測范圍:                                                          96T
                          10 ng/L -400 ng/L

                          使用目的:
                          本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中白細胞介素-10(IL-10)含量。
                          實驗原理
                          本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人白細胞介素-10(IL-10)水平。用純化的人白細胞介素-10(IL-10)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素-10(IL-10),再與HRP標記的白細胞介素-10(IL-10)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素-10(IL-10)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人白細胞介素-10(IL-10)濃度。
                          試劑盒組成
                          1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶
                          2 酶標試劑 6ml×1瓶 8 標準品(800ng/L) 0.5ml×1瓶
                          3 酶標包被板 12孔×8條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶
                          4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份
                          5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張 
                          6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個
                          標本要求
                          1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
                          2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
                          操作步驟
                          1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
                          400 ng/L 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
                          200 ng/L 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
                          100 ng/L 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
                          50 ng/L 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
                          25 ng/L 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
                          2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
                          3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
                          4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
                          5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
                          6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
                          7. 溫育:操作同3。
                          8. 洗滌:操作同5。
                          9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
                          10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
                          11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
                          操作程序總結:
                          計算
                            以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
                          注意事項
                          1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
                          2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
                          3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
                          4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
                          5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
                          6.底物請避光保存。
                          7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
                          8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
                          9.本試劑不同批號組分不得混用。
                          10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
                          保存條件及有效期
                          1.試劑盒保存:;2-8℃。
                          2.有效期:6個月

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